頂空色譜分析方法-2

   將頂空色譜分析方法常用的設(shè)備拍成照片，圖-1樣品瓶有兩種體積（9mL,12mL），根據(jù)樣品用量不同選用；圖-2密封鉗（紅色為封瓶口鉗，黑色為開瓶口鉗）；圖-3取樣器（從50μL~1000μL）能準(zhǔn)確吸取液體樣品的重要工具；圖-4加熱塊（俯視和正視可調(diào)溫度加熱塊圖，用來加熱樣品瓶）。一般用10~25μL注射器抽取液上氣體進(jìn)樣。
二、試劑和樣品
⒈ 標(biāo)準(zhǔn)樣品 含內(nèi)標(biāo)的乙醇溶液：用0.9%生理鹽水配制0.4%乙醇和0.2%特丁醇（內(nèi)標(biāo)）；內(nèi)標(biāo)溶液：用0.9%生理鹽水配制0.2%特丁醇（內(nèi)標(biāo)）；混合標(biāo)樣：用0.9%生理鹽水配制甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇、異丁醇和特丁醇七種醇各0.7%。
⒉ 被測樣品——⑴ 提取死者肖小寶心血和胃內(nèi)容各5mL  ⑵ 呂某的靜脈血各4mL，密封、冰凍保存立即送檢
三、條件和圖譜
        ⒈ 色譜條件——柱溫：填充柱在100℃~160℃，毛細(xì)柱在40℃~60℃。柱前壓：填充柱在270~350kpa，毛細(xì)柱在150~180kpa。樣品瓶加熱溫度：均在75℃~85℃。樣品瓶加溫平衡時(shí)間：一般選用20~25min。
　　⒉ 結(jié)果圖譜——



四、結(jié)果和討論
⑴ 加有內(nèi)標(biāo)（特丁醇）含乙醇樣品的定量分析，在數(shù)據(jù)處理?xiàng)l件設(shè)置合適情況下（如在含量低時(shí)，內(nèi)設(shè)值峰寬不能用5而應(yīng)改為2、zui小面積相應(yīng)改為100，不能設(shè)為500等），實(shí)踐證明，采用土法頂空進(jìn)樣分析結(jié)果一樣準(zhǔn)確可靠，保留了頂空色譜分析方法的全部優(yōu)點(diǎn)。

⑵ 樣品加熱平衡時(shí)間長點(diǎn)好，一般設(shè)為20min-25min，邊加熱邊小振搖，有利乙醇的揮發(fā)。注射器在使用之前也需預(yù)熱，并用被測樣品瓶中氣體洗滌飽和后方可進(jìn)樣。

⑶ 當(dāng)頂空進(jìn)樣器壞了或分析不準(zhǔn)確時(shí)，也有采用三氯乙suan沉淀蛋白，高速離心后，直接將上清液進(jìn)樣，這是一種要求在高溫下進(jìn)樣，對柱子的污染會少點(diǎn)，但容易造成分離不*，計(jì)算不準(zhǔn)確的后果。

⑷ 土法頂空進(jìn)樣與頂空進(jìn)樣器進(jìn)樣主要不同在加熱塊升溫、樣品瓶加熱和振搖、抽取液上氣體和注入色譜儀進(jìn)樣口等，全過程均為人工控制，手動(dòng)完成，與頂空進(jìn)樣器全過程是自動(dòng)化不同，容易造成重現(xiàn)性差。如內(nèi)標(biāo)物選擇適當(dāng)，操作誤差不影響分析結(jié)果，但同一時(shí)間內(nèi)平行操作十分重要。

⑸ 土法頂空進(jìn)樣需用注射針，一般使用10-25μL或1.0mL體積，在進(jìn)樣前需將注射針先預(yù)熱，用被測液上氣相抽洗或飽和注射針，然后抽取所需體積的氣體注入氣相色譜進(jìn)樣口，全部操作在相同條件下進(jìn)行。